nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவி பதிப்பில் குறைந்த CSS ஆதரவு உள்ளது. சிறந்த அனுபவத்திற்கு, சமீபத்திய உலாவி பதிப்பைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்குதல்). கூடுதலாக, தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்ய, இந்த தளம் ஸ்டைல்கள் அல்லது ஜாவாஸ்கிரிப்டை சேர்க்காது.
மெலமைன் என்பது அங்கீகரிக்கப்பட்ட உணவு மாசுபாடு ஆகும், இது சில உணவு வகைகளில் தற்செயலாகவும் வேண்டுமென்றும் இருக்கலாம். இந்த ஆய்வின் நோக்கம் குழந்தை பால் மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைனின் கண்டறிதல் மற்றும் அளவை சரிபார்ப்பதாகும். ஈரானின் பல்வேறு பகுதிகளிலிருந்து குழந்தை பால் மற்றும் பால் பவுடர் உட்பட மொத்தம் 40 வணிக ரீதியாக கிடைக்கக்கூடிய உணவு மாதிரிகள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. மாதிரிகளின் தோராயமான மெலமைன் உள்ளடக்கம் உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி-புற ஊதா (HPLC-UV) அமைப்பைப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது. 0.1–1.2 μg mL−1 வரம்பில் மெலமைனைக் கண்டறிவதற்காக ஒரு அளவுத்திருத்த வளைவு (R2 = 0.9925) கட்டமைக்கப்பட்டது. அளவீடு மற்றும் கண்டறிதலின் வரம்புகள் முறையே 1 μg mL−1 மற்றும் 3 μg mL−1 ஆகும். குழந்தைகளுக்கான பால் கலவை மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைன் சோதிக்கப்பட்டது, மேலும் குழந்தைகளுக்கான பால் கலவை மற்றும் பால் பவுடர் மாதிரிகளில் மெலமைன் அளவுகள் முறையே 0.001–0.095 மிகி kg−1 மற்றும் 0.001–0.004 மிகி kg−1 என முடிவுகள் காட்டுகின்றன. இந்த மதிப்புகள் EU சட்டம் மற்றும் கோடெக்ஸ் அலிமென்டேரியஸுடன் ஒத்துப்போகின்றன. மெலமைன் உள்ளடக்கம் குறைவாக உள்ள இந்த பால் பொருட்களின் நுகர்வு நுகர்வோர் ஆரோக்கியத்திற்கு குறிப்பிடத்தக்க ஆபத்தை ஏற்படுத்தாது என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும். ஆபத்து மதிப்பீட்டின் முடிவுகளாலும் இது ஆதரிக்கப்படுகிறது.
மெலமைன் என்பது C3H6N6 என்ற மூலக்கூறு சூத்திரத்தைக் கொண்ட ஒரு கரிம சேர்மமாகும், இது சயனமைடிலிருந்து பெறப்படுகிறது. இது தண்ணீரில் மிகக் குறைந்த கரைதிறனைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் தோராயமாக 66% நைட்ரஜனைக் கொண்டுள்ளது. மெலமைன் என்பது பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் தொழில்துறை சேர்மமாகும், இது பிளாஸ்டிக், உரங்கள் மற்றும் உணவு பதப்படுத்தும் உபகரணங்கள் (உணவு பேக்கேஜிங் மற்றும் சமையலறைப் பொருட்கள் உட்பட) உற்பத்தியில் பரந்த அளவிலான சட்டப்பூர்வ பயன்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளது. 1,2. நோய்களுக்கான சிகிச்சைக்கான மருந்து கேரியராகவும் மெலமைன் பயன்படுத்தப்படுகிறது. மெலமைனில் அதிக அளவு நைட்ரஜன் இருப்பதால், கலவை தவறாகப் பயன்படுத்தப்படுவதற்கும், புரத மூலக்கூறுகளின் பண்புகளை உணவுப் பொருட்களுக்கு வழங்குவதற்கும் வழிவகுக்கும்3,4. எனவே, பால் பொருட்கள் உட்பட உணவுப் பொருட்களில் மெலமைனைச் சேர்ப்பது நைட்ரஜன் உள்ளடக்கத்தை அதிகரிக்கிறது. இதனால், பாலில் உள்ள புரத உள்ளடக்கம் உண்மையில் இருந்ததை விட அதிகமாக இருப்பதாக தவறாக முடிவு செய்யப்பட்டது.
ஒவ்வொரு கிராம் மெலமைனும் சேர்க்கப்படும்போது, ​​உணவில் உள்ள புரத உள்ளடக்கம் 0.4% அதிகரிக்கும். இருப்பினும், மெலமைன் தண்ணீரில் அதிகம் கரையக்கூடியது மற்றும் மிகவும் கடுமையான தீங்கு விளைவிக்கும். பால் போன்ற திரவப் பொருட்களில் 1.3 கிராம் மெலமைனைச் சேர்ப்பது பாலின் புரத உள்ளடக்கத்தை 30% அதிகரிக்கும். 5,6. புரத உள்ளடக்கத்தை அதிகரிக்க விலங்குகள் மற்றும் மனித உணவுகளில் கூட மெலமைன் சேர்க்கப்பட்டாலும்7, கோடெக்ஸ் அலிமென்டேரியஸ் கமிஷன் (CAC) மற்றும் தேசிய அதிகாரிகள் மெலமைனை உணவு சேர்க்கையாக அங்கீகரிக்கவில்லை, மேலும் விழுங்கினால், உள்ளிழுத்தால் அல்லது தோல் வழியாக உறிஞ்சப்பட்டால் அது ஆபத்தானது என்று பட்டியலிட்டுள்ளனர். 2012 ஆம் ஆண்டில், உலக சுகாதார அமைப்பின் (WHO) புற்றுநோய் ஆராய்ச்சிக்கான சர்வதேச நிறுவனம் மெலமைனை ஒரு வகுப்பு 2B புற்றுநோயாக பட்டியலிட்டது, ஏனெனில் இது மனித ஆரோக்கியத்திற்கு தீங்கு விளைவிக்கும்8. மெலமைனுக்கு நீண்டகால வெளிப்பாடு புற்றுநோய் அல்லது சிறுநீரக சேதத்தை ஏற்படுத்தக்கூடும்2. உணவில் உள்ள மெலமைன் சயனூரிக் அமிலத்துடன் இணைந்து நீரில் கரையாத மஞ்சள் படிகங்களை உருவாக்குகிறது, இது சிறுநீரகம் மற்றும் சிறுநீர்ப்பை திசுக்களுக்கு சேதத்தை ஏற்படுத்தும், அத்துடன் சிறுநீர் பாதை புற்றுநோய் மற்றும் எடை இழப்பையும் ஏற்படுத்தும்9,10. இது கடுமையான உணவு நச்சுத்தன்மையையும், அதிக செறிவுகளில், குறிப்பாக குழந்தைகள் மற்றும் இளம் குழந்தைகளில் மரணத்தையும் ஏற்படுத்தும்.11 உலக சுகாதார அமைப்பு (WHO) CAC வழிகாட்டுதல்களின் அடிப்படையில் மனிதர்களுக்கு மெலமைனின் சகிக்கக்கூடிய தினசரி உட்கொள்ளலை (TDI) ஒரு நாளைக்கு 0.2 மி.கி/கிலோ உடல் எடையாக நிர்ணயித்துள்ளது.12 அமெரிக்க உணவு மற்றும் மருந்து நிர்வாகம் (US FDA) மெலமைனுக்கான அதிகபட்ச எச்ச அளவை குழந்தை பால் சூத்திரத்தில் 1 மி.கி/கிலோ மற்றும் பிற உணவுகளில் 2.5 மி.கி/கிலோ என நிர்ணயித்துள்ளது.2,7 செப்டம்பர் 2008 இல், பல உள்நாட்டு குழந்தை பால் சூத்திர உற்பத்தியாளர்கள் தங்கள் தயாரிப்புகளின் புரத உள்ளடக்கத்தை அதிகரிக்க பால் பவுடரில் மெலமைனைச் சேர்த்ததாக அறிவிக்கப்பட்டது, இதன் விளைவாக பால் பவுடர் விஷம் ஏற்பட்டது மற்றும் நாடு தழுவிய மெலமைன் விஷம் சம்பவத்தைத் தூண்டியது, இது 294,000 க்கும் மேற்பட்ட குழந்தைகளை நோய்வாய்ப்படுத்தியது மற்றும் 50,000 க்கும் மேற்பட்டவர்களை மருத்துவமனையில் சேர்த்தது. 13
நகர்ப்புற வாழ்க்கையின் சிரமங்கள், தாய் அல்லது குழந்தையின் நோய் போன்ற பல்வேறு காரணிகளால் தாய்ப்பால் கொடுப்பது எப்போதும் சாத்தியமில்லை, இது குழந்தைகளுக்கு உணவளிக்க குழந்தை பால் கலவையைப் பயன்படுத்த வழிவகுக்கிறது. இதன் விளைவாக, தாய்ப்பாலுக்கு முடிந்தவரை நெருக்கமான கலவையுடன் கூடிய குழந்தை பால் கலவையை உற்பத்தி செய்ய தொழிற்சாலைகள் நிறுவப்பட்டுள்ளன14. சந்தையில் விற்கப்படும் குழந்தை பால் கலவை பொதுவாக பசுவின் பாலில் இருந்து தயாரிக்கப்படுகிறது மற்றும் பொதுவாக கொழுப்புகள், புரதங்கள், கார்போஹைட்ரேட்டுகள், வைட்டமின்கள், தாதுக்கள் மற்றும் பிற சேர்மங்களின் சிறப்பு கலவையுடன் தயாரிக்கப்படுகிறது. தாய்ப்பாலுக்கு அருகில் இருக்க, பால் கலவையின் புரதம் மற்றும் கொழுப்பு உள்ளடக்கம் மாறுபடும், மேலும் பால் வகையைப் பொறுத்து, அவை வைட்டமின்கள் மற்றும் இரும்பு போன்ற தாதுக்கள் போன்ற சேர்மங்களால் செறிவூட்டப்படுகின்றன15. குழந்தைகள் ஒரு உணர்திறன் குழுவாக இருப்பதால், விஷம் ஏற்படும் அபாயம் இருப்பதால், பால் பவுடர் நுகர்வு பாதுகாப்பு ஆரோக்கியத்திற்கு மிகவும் முக்கியமானது. சீன குழந்தைகளிடையே மெலமைன் விஷம் ஏற்பட்ட பிறகு, உலகெங்கிலும் உள்ள நாடுகள் இந்த பிரச்சினையில் மிகுந்த கவனம் செலுத்தியுள்ளன, மேலும் இந்த பகுதியின் உணர்திறனும் அதிகரித்துள்ளது. எனவே, குழந்தைகளின் ஆரோக்கியத்தைப் பாதுகாக்க, குழந்தை பால் தயாரிப்பு கட்டுப்பாட்டை வலுப்படுத்துவது மிகவும் முக்கியம். உணவில் மெலமைனைக் கண்டறிவதற்கு உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC), எலக்ட்ரோபோரேசிஸ், சென்சார் முறை, ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமெட்ரி மற்றும் ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி என்சைம்-இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் மதிப்பீடு உள்ளிட்ட பல்வேறு முறைகள் உள்ளன. 2007 ஆம் ஆண்டில், அமெரிக்க உணவு மற்றும் மருந்து நிர்வாகம் (FDA) உணவில் மெலமைன் மற்றும் சயனூரிக் அமிலத்தை நிர்ணயிப்பதற்கான HPLC முறையை உருவாக்கி வெளியிட்டது, இது மெலமைன் உள்ளடக்கத்தை நிர்ணயிப்பதற்கான மிகவும் பயனுள்ள முறையாகும்.
புதிய அகச்சிவப்பு நிறமாலை நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்ட குழந்தை சூத்திரத்தில் மெலமைன் செறிவுகள் ஒரு கிலோகிராமுக்கு 0.33 முதல் 0.96 மில்லிகிராம் வரை (மிகி கிலோ-1) இருந்தன. 18 இலங்கையில் நடத்தப்பட்ட ஒரு ஆய்வில், முழு பால் பவுடரில் மெலமைன் அளவுகள் 0.39 முதல் 0.84 மி.கி கிலோ-1 வரை இருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டது. கூடுதலாக, இறக்குமதி செய்யப்பட்ட குழந்தை சூத்திர மாதிரிகளில் முறையே 0.96 மற்றும் 0.94 மி.கி/கிலோ என்ற அளவில் மெலமைனின் அதிகபட்ச அளவுகள் உள்ளன. இந்த அளவுகள் ஒழுங்குமுறை வரம்பிற்குக் கீழே (1 மி.கி/கிலோ) உள்ளன, ஆனால் நுகர்வோர் பாதுகாப்பிற்கு ஒரு கண்காணிப்புத் திட்டம் தேவை. 19
ஈரானிய குழந்தைகளுக்கான பால்பொருட்களில் மெலமைனின் அளவை பல ஆய்வுகள் ஆய்வு செய்துள்ளன. சுமார் 65% மாதிரிகளில் மெலமைன் உள்ளது, சராசரியாக 0.73 மிகி/கிலோ மற்றும் அதிகபட்சம் 3.63 மிகி/கிலோ. மற்றொரு ஆய்வு, குழந்தைகளுக்கான பால்பொருட்களில் மெலமைனின் அளவு 0.35 முதல் 3.40 μg/கிலோ வரை இருந்தது, சராசரியாக 1.38 μg/கிலோ என்று தெரிவித்தது. ஒட்டுமொத்தமாக, ஈரானிய குழந்தைகளுக்கான பால்பொருட்களில் மெலமைனின் இருப்பு மற்றும் அளவு பல்வேறு ஆய்வுகளில் மதிப்பிடப்பட்டுள்ளது, சில மாதிரிகளில் ஒழுங்குமுறை அதிகாரிகள் (2.5 மிகி/கிலோ/தீவனம்) நிர்ணயித்த அதிகபட்ச வரம்பை விட அதிகமாக மெலமைன் உள்ளது.
உணவுத் துறையில் பால் பவுடரின் நேரடி மற்றும் மறைமுக நுகர்வு அதிகமாக இருப்பதையும், குழந்தைகளுக்கு உணவளிப்பதில் குழந்தை பால் பவுடரின் சிறப்பு முக்கியத்துவத்தையும் கருத்தில் கொண்டு, இந்த ஆய்வு பால் பவுடர் மற்றும் குழந்தை பால் பவுடரில் மெலமைனைக் கண்டறியும் முறையைச் சரிபார்க்கும் நோக்கத்தைக் கொண்டிருந்தது. உண்மையில், இந்த ஆய்வின் முதல் நோக்கம், உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC) மற்றும் புற ஊதா (UV) கண்டறிதலைப் பயன்படுத்தி குழந்தை பால் பவுடர் மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைன் கலப்படத்தைக் கண்டறிவதற்கான விரைவான, எளிமையான மற்றும் துல்லியமான அளவு முறையை உருவாக்குவதாகும்; இரண்டாவதாக, ஈரானிய சந்தையில் விற்கப்படும் குழந்தை பால் பவுடர் மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைன் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிப்பதே இந்த ஆய்வின் நோக்கமாகும்.
மெலமைன் பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்படும் கருவிகள் உணவு உற்பத்தி இடத்தைப் பொறுத்து மாறுபடும். பால் மற்றும் குழந்தை பால் சூத்திரத்தில் உள்ள மெலமைன் எச்சங்களை அளவிடுவதற்கு ஒரு உணர்திறன் மற்றும் நம்பகமான HPLC-UV பகுப்பாய்வு முறை பயன்படுத்தப்பட்டது. பால் பொருட்களில் மெலமைன் அளவீட்டில் தலையிடக்கூடிய பல்வேறு புரதங்கள் மற்றும் கொழுப்புகள் உள்ளன. எனவே, சன் மற்றும் பலர் குறிப்பிட்டுள்ளபடி. 22, கருவி பகுப்பாய்விற்கு முன் பொருத்தமான மற்றும் பயனுள்ள சுத்திகரிப்பு உத்தி அவசியம். இந்த ஆய்வில், நாங்கள் பயன்படுத்திவிட்டுவிடும் சிரிஞ்ச் வடிகட்டிகளைப் பயன்படுத்தினோம். இந்த ஆய்வில், குழந்தை பால் சூத்திரம் மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைனைப் பிரிக்க C18 நெடுவரிசையைப் பயன்படுத்தினோம். படம் 1 மெலமைன் கண்டறிதலுக்கான குரோமடோகிராமைக் காட்டுகிறது. கூடுதலாக, 0.1–1.2 மி.கி/கிலோ மெலமைன் கொண்ட மாதிரிகளின் மீட்பு 95% முதல் 109% வரை இருந்தது, பின்னடைவு சமன்பாடு y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), மற்றும் தொடர்புடைய நிலையான விலகல் (RSD) மதிப்புகள் 0.8 முதல் 2% வரை இருந்தன. கிடைக்கக்கூடிய தரவுகள், ஆய்வு செய்யப்பட்ட செறிவு வரம்பில் இந்த முறை நம்பகமானது என்பதைக் குறிக்கிறது (அட்டவணை 1). மெலமைனின் கண்டறிதலின் கருவி வரம்பு (LOD) மற்றும் அளவீட்டு வரம்பு (LOQ) முறையே 1 μg mL−1 மற்றும் 3 μg mL−1 ஆகும். கூடுதலாக, மெலமைனின் UV நிறமாலை 242 nm இல் ஒரு உறிஞ்சுதல் பட்டையை வெளிப்படுத்தியது. கண்டறிதல் முறை உணர்திறன், நம்பகமானது மற்றும் துல்லியமானது. மெலமைன் அளவை வழக்கமாக தீர்மானிக்க இந்த முறையைப் பயன்படுத்தலாம்.
இதே போன்ற முடிவுகள் பல ஆசிரியர்களால் வெளியிடப்பட்டுள்ளன. பால் பொருட்களில் மெலமைனின் பகுப்பாய்விற்காக ஒரு உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி-ஃபோட்டோடையோடு வரிசை (HPLC) முறை உருவாக்கப்பட்டது. 240 nm இல் பால் பவுடருக்கு 340 μg kg−1 மற்றும் குழந்தை பால் பவுடருக்கு 280 μg kg−1 அளவீட்டின் குறைந்த வரம்புகள். HPLC ஆல் குழந்தை பால் பவுடரில் மெலமைன் கண்டறியப்படவில்லை என்று ஃபிலாஸி மற்றும் பலர் (2012) தெரிவித்தனர். இருப்பினும், 8% பால் பவுடர் மாதிரிகளில் 0.505–0.86 mg/kg அளவில் மெலமைன் இருந்தது. டிட்டில்மிட் மற்றும் பலர்.23 இதேபோன்ற ஆய்வை மேற்கொண்டனர் மற்றும் உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி-மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி/MS (HPLC-MS/MS) மூலம் குழந்தை பால் பவுடரில் (மாதிரி எண்: 72) மெலமைன் உள்ளடக்கம் தோராயமாக 0.0431–0.346 mg kg−1 என தீர்மானித்தனர். வெங்கடசாமி மற்றும் பலர் நடத்திய ஆய்வில். (2010), குழந்தை பால் மற்றும் பாலில் மெலமைனை மதிப்பிடுவதற்கு ஒரு பச்சை வேதியியல் அணுகுமுறை (அசிட்டோனிட்ரைல் இல்லாமல்) மற்றும் தலைகீழ்-கட்ட உயர்-செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராபி (RP-HPLC) பயன்படுத்தப்பட்டன. மாதிரி செறிவு வரம்பு 1.0 முதல் 80 கிராம்/மிலி வரை இருந்தது மற்றும் பதில் நேரியல் (r > 0.999). இந்த முறை 5–40 கிராம்/மிலி செறிவு வரம்பில் 97.2–101.2 மீட்டெடுப்புகளைக் காட்டியது மற்றும் இனப்பெருக்கம் 1.0% ஒப்பீட்டு நிலையான விலகலை விடக் குறைவாக இருந்தது. மேலும், கவனிக்கப்பட்ட LOD மற்றும் LOQ முறையே 0.1 கிராம் mL−1 மற்றும் 0.2 கிராம் mL−124 ஆகும். லுட்டர் மற்றும் பலர் (2011) HPLC-UV ஐப் பயன்படுத்தி பசுவின் பால் மற்றும் பால் சார்ந்த குழந்தை பால் சூத்திரத்தில் மெலமைன் மாசுபாட்டை தீர்மானித்தனர். மெலமைன் செறிவுகள் < 0.2 முதல் 2.52 மி.கி HPLC-UV முறையின் நேரியல் டைனமிக் வரம்பு பசுவின் பாலுக்கு 0.05 முதல் 2.5 மி.கி. கி.கி−1 ஆகவும், புரத நிறை பின்னம் <15% கொண்ட குழந்தை சூத்திரத்திற்கு 0.13 முதல் 6.25 மி.கி. கி.கி−1 ஆகவும், புரத நிறை பின்னம் 15% கொண்ட குழந்தை சூத்திரத்திற்கு 0.25 முதல் 12.5 மி.கி. கி.கி−1 ஆகவும் இருந்தது. LOD (மற்றும் LOQ) முடிவுகள் பசுவின் பாலுக்கு 0.03 மி.கி. கி.கி−1 (0.09 மி.கி. கி.கி−1), குழந்தை சூத்திரம் <15% புரதத்திற்கு 0.06 மி.கி. கி.கி−1 (0.18 மி.கி. கி.கி−1) மற்றும் குழந்தை சூத்திரம் 15% புரதத்திற்கு 0.12 மி.கி. கி.கி−1 (0.36 மி.கி. கி.கி−1) ஆகவும், LOD மற்றும் LOQ க்கு முறையே 3 மற்றும் 1025 என்ற சிக்னல்-இரைச்சல் விகிதத்துடன் இருந்தன. டைப்ஸ் மற்றும் பலர் (2012) HPLC/DMD ஐப் பயன்படுத்தி குழந்தை சூத்திரம் மற்றும் பால் பவுடர் மாதிரிகளில் மெலமைன் அளவை ஆய்வு செய்தனர். குழந்தை பால் சூத்திரத்தில், குறைந்தபட்ச மற்றும் அதிகபட்ச அளவுகள் முறையே 9.49 மிகி கிலோ−1 மற்றும் 258 மிகி கிலோ−1 ஆகும். கண்டறிதல் வரம்பு (LOD) 0.05 மிகி கிலோ−1 ஆகும்.
ஜாவைத் மற்றும் பலர், ஃபோரியர் டிரான்ஸ்ஃபார்ம் அகச்சிவப்பு நிறமாலை (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1) மூலம் குழந்தைகளுக்கான ஃபார்முலாவில் மெலமைன் எச்சங்கள் 0.002–2 mg kg−1 வரம்பில் இருப்பதாக தெரிவித்தனர். ரெசாய் மற்றும் பலர், மெலமைனை மதிப்பிடுவதற்கு ஒரு HPLC-DDA (λ = 220 nm) முறையை முன்மொழிந்தனர் மற்றும் பால் பவுடருக்கு 0.08 μg mL−1 LOQ ஐ அடைந்தனர், இது இந்த ஆய்வில் பெறப்பட்ட அளவை விடக் குறைவாக இருந்தது. சன் மற்றும் பலர், திரவப் பாலில் மெலமைனை திட நிலை பிரித்தெடுத்தல் (SPE) மூலம் கண்டறிவதற்காக ஒரு RP-HPLC-DAD ஐ உருவாக்கினர். அவர்கள் முறையே 18 மற்றும் 60 μg kg−128 LOD மற்றும் LOQ ஐப் பெற்றனர், இது தற்போதைய ஆய்வை விட அதிக உணர்திறன் கொண்டது. மான்டெசானோ மற்றும் பலர். 0.05–3 மிகி/கிலோ அளவீட்டு வரம்புடன் புரத சப்ளிமெண்ட்களில் மெலமைன் உள்ளடக்கத்தை மதிப்பிடுவதற்கான HPLC-DMD முறையின் செயல்திறனை உறுதிப்படுத்தியது, இது இந்த ஆய்வில் பயன்படுத்தப்பட்ட முறையை விட குறைவான உணர்திறன் கொண்டது29.
சந்தேகத்திற்கு இடமின்றி, பல்வேறு மாதிரிகளில் மாசுபடுத்திகளைக் கண்காணிப்பதன் மூலம் சுற்றுச்சூழலைப் பாதுகாப்பதில் பகுப்பாய்வு ஆய்வகங்கள் முக்கிய பங்கு வகிக்கின்றன. இருப்பினும், பகுப்பாய்வின் போது அதிக எண்ணிக்கையிலான வினைப்பொருட்கள் மற்றும் கரைப்பான்களைப் பயன்படுத்துவது அபாயகரமான எச்சங்களை உருவாக்குவதற்கு வழிவகுக்கும். எனவே, ஆபரேட்டர்கள் மற்றும் சுற்றுச்சூழலில் பகுப்பாய்வு நடைமுறைகளின் பாதகமான விளைவுகளைக் குறைக்க அல்லது நீக்க 2000 ஆம் ஆண்டில் பசுமை பகுப்பாய்வு வேதியியல் (GAC) உருவாக்கப்பட்டது. குரோமடோகிராபி, எலக்ட்ரோபோரேசிஸ், கேபிலரி எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் என்சைம்-இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் அஸே (ELISA) உள்ளிட்ட பாரம்பரிய மெலமைன் கண்டறிதல் முறைகள் மெலமைனை அடையாளம் காணப் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன. இருப்பினும், ஏராளமான கண்டறிதல் முறைகளில், மின்வேதியியல் சென்சார்கள் அவற்றின் சிறந்த உணர்திறன், தேர்ந்தெடுப்புத்திறன், விரைவான பகுப்பாய்வு நேரம் மற்றும் பயனர் நட்பு பண்புகள் காரணமாக அதிக கவனத்தை ஈர்த்துள்ளன. பசுமை நானோ தொழில்நுட்பம் நானோ பொருட்களை ஒருங்கிணைக்க உயிரியல் பாதைகளைப் பயன்படுத்துகிறது, இது அபாயகரமான கழிவுகள் மற்றும் ஆற்றல் நுகர்வு உருவாவதைக் குறைக்கும், இதன் மூலம் நிலையான நடைமுறைகளை செயல்படுத்துவதை ஊக்குவிக்கிறது. எடுத்துக்காட்டாக, சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்த பொருட்களிலிருந்து தயாரிக்கப்படும் நானோகலவைகள், மெலமைன் போன்ற பொருட்களைக் கண்டறிய பயோசென்சர்களில் பயன்படுத்தப்படலாம்32,33,34.
பாரம்பரிய பிரித்தெடுக்கும் முறைகளுடன் ஒப்பிடும்போது அதன் அதிக ஆற்றல் திறன் மற்றும் நிலைத்தன்மை காரணமாக திட-கட்ட நுண் பிரித்தெடுத்தல் (SPME) திறம்பட பயன்படுத்தப்படுகிறது என்பதை ஆய்வு காட்டுகிறது. SPME இன் சுற்றுச்சூழல் நட்பு மற்றும் ஆற்றல் திறன் பகுப்பாய்வு வேதியியலில் பாரம்பரிய பிரித்தெடுக்கும் முறைகளுக்கு ஒரு சிறந்த மாற்றாக அமைகிறது மற்றும் மாதிரி தயாரிப்பிற்கு மிகவும் நிலையான மற்றும் திறமையான முறையை வழங்குகிறது35.
2013 ஆம் ஆண்டில், வு மற்றும் பலர், மெலமைன் மற்றும் ஆன்டி-மெலமைன் ஆன்டிபாடிகளுக்கு இடையிலான இணைப்பைப் பயன்படுத்தி, ஒரு இம்யூனோஅஸ்ஸேயைப் பயன்படுத்தி குழந்தை சூத்திரத்தில் மெலமைனை விரைவாகக் கண்டறிய, மிகவும் உணர்திறன் வாய்ந்த மற்றும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மேற்பரப்பு பிளாஸ்மோன் ரெசோனன்ஸ் (மினி-SPR) பயோசென்சரை உருவாக்கினர். SPR பயோசென்சர், இம்யூனோஅஸ்ஸேயுடன் (மெலமைன்-இணைந்த போவின் சீரம் அல்புமினைப் பயன்படுத்தி) இணைந்து, 0.02 μg mL-136 மட்டுமே கண்டறியும் வரம்பைக் கொண்ட, பயன்படுத்த எளிதான மற்றும் குறைந்த விலை தொழில்நுட்பமாகும்.
வணிக மாதிரிகளில் மெலமைனைக் கண்டறிய நசிரி மற்றும் அப்பாசியன் கிராஃபீன் ஆக்சைடு-சிட்டோசன் கலவைகளுடன் (GOCS) இணைந்து ஒரு உயர்-சாத்தியமான கையடக்க சென்சார் பயன்படுத்தினர்37. இந்த முறை மிக உயர்ந்த தேர்வுத்திறன், துல்லியம் மற்றும் பதிலைக் காட்டியது. GOCS சென்சார் குறிப்பிடத்தக்க உணர்திறன் (239.1 μM−1), 0.01 முதல் 200 μM வரையிலான நேரியல் வரம்பு, 1.73 × 104 என்ற இணைப்பு மாறிலி மற்றும் 10 nM வரை LOD ஆகியவற்றைக் காட்டியது. மேலும், 2024 ஆம் ஆண்டில் சந்திரசேகர் மற்றும் பலர் நடத்திய ஒரு ஆய்வு சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்த மற்றும் செலவு குறைந்த அணுகுமுறையை ஏற்றுக்கொண்டது. சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்த முறையில் துத்தநாக ஆக்சைடு நானோ துகள்களை (ZnO-NPs) ஒருங்கிணைக்க பப்பாளி தோல் சாற்றை குறைக்கும் முகவராகப் பயன்படுத்தினர். பின்னர், குழந்தை சூத்திரத்தில் மெலமைனைத் தீர்மானிக்க ஒரு தனித்துவமான மைக்ரோ-ராமன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி நுட்பம் உருவாக்கப்பட்டது. விவசாயக் கழிவுகளிலிருந்து பெறப்பட்ட ZnO-NPகள் மதிப்புமிக்க நோயறிதல் கருவியாகவும், மெலமைனைக் கண்காணித்து கண்டறிவதற்கான நம்பகமான, குறைந்த விலை தொழில்நுட்பமாகவும் திறனை நிரூபித்துள்ளன38.
பால் பவுடரில் மெலமைனை தீர்மானிக்க அலிசாதே மற்றும் பலர் (2024) அதிக உணர்திறன் கொண்ட உலோக-கரிம கட்டமைப்பு (MOF) ஃப்ளோரசன்ஸ் தளத்தைப் பயன்படுத்தினர். 3σ/S ஐப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்ட சென்சாரின் நேரியல் வரம்பு மற்றும் குறைந்த கண்டறிதல் வரம்பு முறையே 40 முதல் 396.45 nM (25 μg kg−1 முதல் 0.25 mg kg−1 வரை) மற்றும் 40 nM (25 μg kg−1 க்கு சமம்) ஆகும். இந்த வரம்பு குழந்தை பால் சூத்திரத்தில் (1 mg kg−1) மெலமைனை அடையாளம் காண அமைக்கப்பட்ட அதிகபட்ச எச்ச அளவுகளை (MRLs) விட (1 mg kg−1) மற்றும் பிற உணவு/தீவன மாதிரிகள் (2.5 mg kg−1) மிகவும் குறைவாக உள்ளது. ஃப்ளோரசன்ட் சென்சார் (டெர்பியம் (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) பால் பவுடரில் மெலமைனைக் கண்டறிவதில் HPLC39 ஐ விட அதிக துல்லியம் மற்றும் துல்லியமான அளவீட்டு திறனைக் காட்டியது. பசுமை வேதியியலில் உள்ள பயோசென்சர்கள் மற்றும் நானோகாம்போசிட்டுகள் கண்டறிதல் திறன்களை மேம்படுத்துவதோடு மட்டுமல்லாமல், நிலையான வளர்ச்சி கொள்கைகளுக்கு ஏற்ப சுற்றுச்சூழல் அபாயங்களையும் குறைக்கின்றன.
மெலமைனை நிர்ணயிப்பதற்கான பல்வேறு முறைகளுக்கு பச்சை வேதியியல் கொள்கைகள் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன. ஒரு அணுகுமுறை, இயற்கை துருவ பாலிமர் β-சைக்ளோடெக்ஸ்ட்ரின் சிட்ரிக் அமிலத்துடன் குறுக்கு-இணைக்கப்பட்டதைப் பயன்படுத்தி, குழந்தைகளுக்கான ஃபார்முலா மற்றும் சூடான நீர் போன்ற மாதிரிகளிலிருந்து மெலமைன் 40 ஐ திறம்பட பிரித்தெடுப்பதற்காக ஒரு பச்சை பரவும் திட-கட்ட நுண் பிரித்தெடுத்தல் முறையை உருவாக்குவதாகும். மற்றொரு முறை பால் மாதிரிகளில் மெலமைனை நிர்ணயிப்பதற்கு மன்னிச் எதிர்வினையைப் பயன்படுத்துகிறது. இந்த முறை மலிவானது, சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்தது மற்றும் 0.1–2.5 பிபிஎம் நேரியல் வரம்பு மற்றும் குறைந்த கண்டறிதல் வரம்பு 41 உடன் மிகவும் துல்லியமானது. மேலும், திரவ பால் மற்றும் குழந்தைகளுக்கான ஃபார்முலாவில் மெலமைனின் அளவு நிர்ணயத்திற்கான செலவு குறைந்த மற்றும் சுற்றுச்சூழல் நட்பு முறை ஃபோரியர் டிரான்ஸ்ஃபார்ம் அகச்சிவப்பு டிரான்ஸ்மிஷன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபியைப் பயன்படுத்தி முறையே 1 பிபிஎம் மற்றும் 3.5 பிபிஎம் என்ற உயர் துல்லியம் மற்றும் கண்டறிதல் வரம்புகளுடன் உருவாக்கப்பட்டது. இந்த முறைகள் மெலமைனை நிர்ணயிப்பதற்கான திறமையான மற்றும் நிலையான முறைகளின் வளர்ச்சிக்கு பச்சை வேதியியல் கொள்கைகளின் பயன்பாட்டை நிரூபிக்கின்றன.
மெலமைன் கண்டறிதலுக்கான புதுமையான முறைகளை பல ஆய்வுகள் முன்மொழிந்துள்ளன, அதாவது திட-கட்ட பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் உயர்-செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC)43, அத்துடன் சிக்கலான முன் சிகிச்சை அல்லது அயன்-ஜோடி வினைப்பொருட்கள் தேவையில்லாத வேகமான உயர்-செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC), இதன் மூலம் இரசாயன கழிவுகளின் அளவைக் குறைக்கிறது44. இந்த முறைகள் பால் பொருட்களில் மெலமைனை நிர்ணயிப்பதற்கான துல்லியமான முடிவுகளை வழங்குவதோடு மட்டுமல்லாமல், பசுமை வேதியியலின் கொள்கைகளுக்கும் இணங்குகின்றன, அபாயகரமான இரசாயனங்களின் பயன்பாட்டைக் குறைக்கின்றன மற்றும் பகுப்பாய்வு செயல்முறையின் ஒட்டுமொத்த சுற்றுச்சூழல் தாக்கத்தைக் குறைக்கின்றன.
வெவ்வேறு பிராண்டுகளின் நாற்பது மாதிரிகள் மும்மடங்காக சோதிக்கப்பட்டன, அதன் முடிவுகள் அட்டவணை 2 இல் வழங்கப்பட்டுள்ளன. குழந்தை பால் கலவை மற்றும் பால் பவுடர் மாதிரிகளில் மெலமைன் அளவுகள் முறையே 0.001 முதல் 0.004 மி.கி/கி.கி வரையிலும், 0.001 முதல் 0.095 மி.கி/கி.கி வரையிலும் இருந்தன. குழந்தை பால் கலவையைப் பயன்படுத்தும் மூன்று வயதுக் குழுக்களிடையே குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்கள் எதுவும் காணப்படவில்லை. கூடுதலாக, 80% பால் பவுடரில் மெலமைன் கண்டறியப்பட்டது, ஆனால் 65% குழந்தை பால் கலவைகள் மெலமைனால் மாசுபட்டிருந்தன.
தொழில்துறை பால் பவுடரில் உள்ள மெலமைன் உள்ளடக்கம் குழந்தை பால் சூத்திரத்தை விட அதிகமாக இருந்தது, மேலும் வேறுபாடு குறிப்பிடத்தக்கதாக இருந்தது (ப <0.05) (படம் 2).
பெறப்பட்ட முடிவுகள் FDA ஆல் நிர்ணயிக்கப்பட்ட வரம்புகளுக்குக் கீழே இருந்தன (1 மற்றும் 2.5 mg/kg க்குக் கீழே). கூடுதலாக, முடிவுகள் CAC (2010) மற்றும் EU45,46 ஆல் நிர்ணயிக்கப்பட்ட வரம்புகளுக்கு ஏற்ப உள்ளன, அதாவது அதிகபட்ச அனுமதிக்கப்பட்ட வரம்பு குழந்தை பால் பொருட்களுக்கு 1 mg kg-1 மற்றும் பால் பொருட்களுக்கு 2.5 mg kg-1 ஆகும்.
2023 ஆம் ஆண்டு கானாட்டி மற்றும் பலர் நடத்திய ஆய்வின்படி, ஈரானில் பல்வேறு வகையான பேக்கேஜ் செய்யப்பட்ட பாலில் மெலமைன் உள்ளடக்கம் 50.7 முதல் 790 μg kg−1 வரை இருந்தது. அவற்றின் முடிவுகள் FDA அனுமதிக்கப்பட்ட வரம்பிற்குக் கீழே இருந்தன. எங்கள் முடிவுகள் Shoder et al.48 மற்றும் Rima et al.49 ஆகியோரை விடக் குறைவு. Shoder et al. (2010) ELISA ஆல் நிர்ணயிக்கப்பட்ட பால் பவுடரில் மெலமைன் அளவுகள் (n=49) 0.5 முதல் 5.5 mg/kg வரை இருப்பதாகக் கண்டறிந்தனர். ரிமா மற்றும் பலர், ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமெட்ரி மூலம் பால் பவுடரில் உள்ள மெலமைன் எச்சங்களை பகுப்பாய்வு செய்தனர், மேலும் பால் பவுடரில் உள்ள மெலமைன் உள்ளடக்கம் 0.72–5.76 mg/kg என்று கண்டறிந்தனர். திரவ குரோமடோகிராஃபி (LC/MS) பயன்படுத்தி குழந்தை பால் சூத்திரத்தில் (n=94) மெலமைன் அளவைக் கண்காணிக்க 2011 இல் கனடாவில் ஒரு ஆய்வு நடத்தப்பட்டது. மெலமைன் செறிவுகள் ஏற்றுக்கொள்ளத்தக்க வரம்பிற்குக் கீழே இருப்பது கண்டறியப்பட்டது (முதற்கட்ட தரநிலை: 0.5 மிகி கிலோ−1). கண்டறியப்பட்ட மோசடி மெலமைன் அளவுகள் புரத உள்ளடக்கத்தை அதிகரிக்கப் பயன்படுத்தப்பட்ட ஒரு தந்திரோபாயமாக இருக்க வாய்ப்பில்லை. இருப்பினும், உரங்களைப் பயன்படுத்துதல், கொள்கலன் உள்ளடக்கங்களை இடமாற்றம் செய்தல் அல்லது இதே போன்ற காரணிகளால் இதை விளக்க முடியாது. மேலும், கனடாவிற்கு இறக்குமதி செய்யப்படும் பால் பவுடரில் மெலமைனின் மூலத்தை வெளியிடவில்லை50.
ஹசானி உள்ளிட்டோர் 2013 ஆம் ஆண்டு ஈரானிய சந்தையில் பால் பவுடர் மற்றும் திரவப் பாலில் உள்ள மெலமைன் உள்ளடக்கத்தை அளந்து இதே போன்ற முடிவுகளைக் கண்டறிந்தனர். ஒரு பிராண்ட் பால் பவுடர் மற்றும் திரவப் பால் தவிர, மற்ற அனைத்து மாதிரிகளிலும் மெலமைன் மாசுபட்டுள்ளதாக முடிவுகள் காட்டுகின்றன, பால் பவுடரில் 1.50 முதல் 30.32 μg g−1 வரையிலும், பாலில் 0.11 முதல் 1.48 μg ml−1 வரையிலும் அளவுகள் இருந்தன. குறிப்பாக, எந்த மாதிரிகளிலும் சயனூரிக் அமிலம் கண்டறியப்படவில்லை, இது நுகர்வோருக்கு மெலமைன் விஷம் ஏற்படுவதற்கான வாய்ப்பைக் குறைத்தது. 51 முந்தைய ஆய்வுகள் பால் பவுடர் கொண்ட சாக்லேட் பொருட்களில் மெலமைன் செறிவை மதிப்பிட்டுள்ளன. இறக்குமதி செய்யப்பட்ட மாதிரிகளில் சுமார் 94% மற்றும் ஈரானிய மாதிரிகளில் 77% மெலமைன் உள்ளது. இறக்குமதி செய்யப்பட்ட மாதிரிகளில் மெலமைன் அளவுகள் 0.032 முதல் 2.692 மி.கி/கி.கி வரை இருந்தன, அதே நேரத்தில் ஈரானிய மாதிரிகளில் 0.013 முதல் 2.600 மி.கி/கி.கி வரை இருந்தன. ஒட்டுமொத்தமாக, 85% மாதிரிகளில் மெலமைன் கண்டறியப்பட்டது, ஆனால் ஒரு குறிப்பிட்ட பிராண்ட் மட்டுமே அனுமதிக்கப்பட்ட வரம்பை விட அதிகமாக இருந்தது.44 டிட்டில்மியர் மற்றும் பலர் பால் பவுடரில் மெலமைன் அளவுகள் 0.00528 முதல் 0.0122 மிகி/கிலோ வரை இருப்பதாக தெரிவித்தனர்.
மூன்று வயதினருக்கான ஆபத்து மதிப்பீட்டு முடிவுகளை அட்டவணை 3 சுருக்கமாகக் கூறுகிறது. அனைத்து வயதினரிடமும் ஆபத்து 1 ஐ விடக் குறைவாக இருந்தது. இதனால், குழந்தைகளுக்கான பால் பொருட்களில் மெலமைனால் புற்றுநோய் அல்லாத சுகாதார ஆபத்து எதுவும் இல்லை.
பால் பொருட்களில் குறைவான அளவு மாசுபாடு, தயாரிப்பின் போது தற்செயலாக மாசுபடுவதால் ஏற்படலாம், அதே நேரத்தில் அதிக அளவு வேண்டுமென்றே சேர்க்கப்படுவதால் ஏற்படலாம். மேலும், குறைந்த மெலமைன் அளவுகளைக் கொண்ட பால் பொருட்களை உட்கொள்வதால் மனித ஆரோக்கியத்திற்கு ஏற்படும் ஒட்டுமொத்த ஆபத்து குறைவாகக் கருதப்படுகிறது. இவ்வளவு குறைந்த அளவு மெலமைன் கொண்ட பொருட்களை உட்கொள்வது நுகர்வோர் ஆரோக்கியத்திற்கு எந்த ஆபத்தையும் ஏற்படுத்தாது என்று முடிவு செய்யலாம்52.
பால் பண்ணைத் தொழிலில் உணவுப் பாதுகாப்பு மேலாண்மையின் முக்கியத்துவத்தைக் கருத்தில் கொண்டு, குறிப்பாக பொது சுகாதாரத்தைப் பாதுகாப்பதில், பால் பவுடர் மற்றும் குழந்தை பால் பவுடரில் உள்ள மெலமைன் அளவுகள் மற்றும் எச்சங்களை மதிப்பிடுவதற்கும் ஒப்பிடுவதற்கும் ஒரு முறையை உருவாக்கி சரிபார்ப்பது மிகவும் முக்கியமானது. குழந்தை பால் பவுடர் மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைனை நிர்ணயிப்பதற்காக ஒரு எளிய மற்றும் துல்லியமான HPLC-UV ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமெட்ரிக் முறை உருவாக்கப்பட்டது. அதன் நம்பகத்தன்மை மற்றும் துல்லியத்தை உறுதி செய்வதற்காக இந்த முறை சரிபார்க்கப்பட்டது. இந்த முறையின் கண்டறிதல் மற்றும் அளவீட்டு வரம்புகள் குழந்தை பால் பவுடர் மற்றும் பால் பவுடரில் மெலமைன் அளவை அளவிடும் அளவுக்கு உணர்திறன் கொண்டதாகக் காட்டப்பட்டது. எங்கள் தரவுகளின்படி, பெரும்பாலான ஈரானிய மாதிரிகளில் மெலமைன் கண்டறியப்பட்டது. கண்டறியப்பட்ட அனைத்து மெலமைன் அளவுகளும் CAC ஆல் நிர்ணயிக்கப்பட்ட அதிகபட்ச அனுமதிக்கப்பட்ட வரம்புகளுக்குக் கீழே இருந்தன, இது இந்த வகையான பால் பொருட்களின் நுகர்வு மனித ஆரோக்கியத்திற்கு ஆபத்தை ஏற்படுத்தாது என்பதைக் குறிக்கிறது.
பயன்படுத்தப்படும் அனைத்து வேதியியல் வினைப்பொருட்களும் பகுப்பாய்வு தரத்தில் இருந்தன: மெலமைன் (2,4,6-ட்ரையமினோ-1,3,5-ட்ரையசின்) 99% தூய்மையானது (சிக்மா-ஆல்ட்ரிச், செயிண்ட் லூயிஸ், MO); HPLC-தர அசிட்டோனிட்ரைல் (மெர்க், டார்ம்ஸ்டாட், ஜெர்மனி); அல்ட்ராப்யூர் நீர் (மில்லிபோர், மோர்ஃப்ஹெய்ம், பிரான்ஸ்). பயன்படுத்திவிட்டு தூக்கி எறியக்கூடிய சிரிஞ்ச் வடிகட்டிகள் (குரோமாஃபில் எக்ஸ்ட்ரா PVDF-45/25, துளை அளவு 0.45 μm, சவ்வு விட்டம் 25 மிமீ) (மச்செரி-நாகல், டியூரன், ஜெர்மனி).
மாதிரிகளைத் தயாரிக்க ஒரு மீயொலி குளியல் (எல்மா, ஜெர்மனி), ஒரு மையவிலக்கு (பெக்மேன் கூல்டர், கிரெஃபெல்ட், ஜெர்மனி) மற்றும் HPLC (KNAUER, ஜெர்மனி) ஆகியவை பயன்படுத்தப்பட்டன.
UV டிடெக்டருடன் கூடிய உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராஃப் (KNAUER, ஜெர்மனி) பயன்படுத்தப்பட்டது. HPLC பகுப்பாய்வு நிலைமைகள் பின்வருமாறு: ODS-3 C18 பகுப்பாய்வு நெடுவரிசை (4.6 மிமீ × 250 மிமீ, துகள் அளவு 5 μm) (MZ, ஜெர்மனி) பொருத்தப்பட்ட UHPLC அல்டிமேட் அமைப்பு பயன்படுத்தப்பட்டது. HPLC எலுவென்ட் (மொபைல் கட்டம்) ஒரு TFA/மெத்தனால் கலவையாகும் (450:50 மிலி) 1 மில்லி நிமிடம்-1 ஓட்ட விகிதம் கொண்டது. கண்டறிதல் அலைநீளம் 242 nm. ஊசி அளவு 100 μL, நெடுவரிசை வெப்பநிலை 20 °C. மருந்தின் தக்கவைப்பு நேரம் நீண்டது (15 நிமிடங்கள்) என்பதால், அடுத்த ஊசி 25 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு செய்யப்பட வேண்டும். தக்கவைப்பு நேரம் மற்றும் மெலமைன் தரநிலைகளின் UV நிறமாலை உச்சத்தை ஒப்பிடுவதன் மூலம் மெலமைன் அடையாளம் காணப்பட்டது.
மெலமைனின் (10 μg/mL) ஒரு நிலையான கரைசல் தண்ணீரைப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்பட்டு, ஒளியிலிருந்து விலகி ஒரு குளிர்சாதன பெட்டியில் (4 °C) சேமிக்கப்பட்டது. ஸ்டாக் கரைசலை மொபைல் கட்டத்துடன் நீர்த்துப்போகச் செய்து, வேலை செய்யும் நிலையான தீர்வுகளைத் தயாரிக்கவும். ஒவ்வொரு நிலையான கரைசலும் HPLC இல் 7 முறை செலுத்தப்பட்டது. தீர்மானிக்கப்பட்ட உச்சப் பகுதி மற்றும் தீர்மானிக்கப்பட்ட செறிவின் பின்னடைவு பகுப்பாய்வு மூலம் அளவுத்திருத்த சமன்பாடு 10 கணக்கிடப்பட்டது.
வணிக ரீதியாகக் கிடைக்கும் பசுவின் பால் பவுடர் (20 மாதிரிகள்) மற்றும் பல்வேறு பிராண்டுகளின் பசுவின் பால் சார்ந்த குழந்தை ஃபார்முலாவின் மாதிரிகள் (20 மாதிரிகள்) ஈரானில் உள்ள உள்ளூர் பல்பொருள் அங்காடிகள் மற்றும் மருந்தகங்களிலிருந்து வெவ்வேறு வயதுடைய (0–6 மாதங்கள், 6–12 மாதங்கள் மற்றும் 12 மாதங்களுக்கு மேல்) குழந்தைகளுக்கு உணவளிக்க வாங்கப்பட்டு, பகுப்பாய்வு வரை குளிரூட்டப்பட்ட வெப்பநிலையில் (4 °C) சேமிக்கப்பட்டன. பின்னர், 1 ± 0.01 கிராம் ஒரே மாதிரியான பால் பவுடர் எடைபோடப்பட்டு அசிட்டோனிட்ரைல்: தண்ணீருடன் (50:50, v/v; 5 மிலி) கலக்கப்பட்டது. கலவை 1 நிமிடம் கிளறி, பின்னர் 30 நிமிடம் மீயொலி குளியலில் ஒலியமைக்கப்பட்டு, இறுதியாக 1 நிமிடம் அசைக்கப்பட்டது. பின்னர் கலவை அறை வெப்பநிலையில் 9000 × கிராம் அளவில் 10 நிமிடம் மையவிலக்கு செய்யப்பட்டு, சூப்பர்நேட்டண்ட் 0.45 μm சிரிஞ்ச் வடிகட்டியைப் பயன்படுத்தி 2 மில்லி ஆட்டோசாம்ப்ளர் குப்பியில் வடிகட்டப்பட்டது. வடிகட்டி (250 μl) பின்னர் தண்ணீரில் (750 μl) கலந்து HPLC அமைப்பில் செலுத்தப்பட்டது 10, 42.
முறையைச் சரிபார்க்க, உகந்த நிலைமைகளின் கீழ் மீட்பு, துல்லியம், கண்டறிதல் வரம்பு (LOD), அளவீட்டு வரம்பு (LOQ) மற்றும் துல்லியம் ஆகியவற்றை நாங்கள் தீர்மானித்தோம். LOD என்பது அடிப்படை இரைச்சல் அளவை விட மூன்று மடங்கு உச்ச உயரம் கொண்ட மாதிரி உள்ளடக்கமாக வரையறுக்கப்பட்டது. மறுபுறம், சிக்னல்-இரைச்சல் விகிதத்தை விட 10 மடங்கு உச்ச உயரம் கொண்ட மாதிரி உள்ளடக்கம் LOQ ஆக வரையறுக்கப்பட்டது.
ஏழு தரவுப் புள்ளிகளைக் கொண்ட அளவுத்திருத்த வளைவைப் பயன்படுத்தி சாதன பதில் தீர்மானிக்கப்பட்டது. வெவ்வேறு மெலமைன் உள்ளடக்கங்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 மற்றும் 1.2). மெலமைன் கணக்கீட்டு நடைமுறையின் நேரியல்பு தீர்மானிக்கப்பட்டது. கூடுதலாக, வெற்று மாதிரிகளில் பல்வேறு நிலைகளில் மெலமைன் சேர்க்கப்பட்டது. குழந்தைகளுக்கான சூத்திரம் மற்றும் தூள் பால் மாதிரிகளில் நிலையான மெலமைன் கரைசலின் 0.1–1.2 μg mL−1 ஐ தொடர்ந்து செலுத்துவதன் மூலம் அளவுத்திருத்த வளைவு கட்டமைக்கப்பட்டது, மேலும் அதன் R2 = 0.9925 ஆகும். செயல்முறையின் மீண்டும் மீண்டும் நிகழும் தன்மை மற்றும் மீண்டும் நிகழும் தன்மை மூலம் துல்லியம் மதிப்பிடப்பட்டது மற்றும் முதல் மற்றும் அடுத்தடுத்த மூன்று நாட்களில் (மும்மடங்காக) மாதிரிகளை செலுத்துவதன் மூலம் அடையப்பட்டது. சேர்க்கப்பட்ட மெலமைனின் மூன்று வெவ்வேறு செறிவுகளுக்கு RSD % ஐக் கணக்கிடுவதன் மூலம் முறையின் மீண்டும் நிகழும் தன்மை மதிப்பிடப்பட்டது. துல்லியத்தை தீர்மானிக்க மீட்பு ஆய்வுகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. பிரித்தெடுக்கும் முறையின் மூலம் மீட்கும் அளவு, குழந்தை பால் மற்றும் உலர்ந்த பால் மாதிரிகளில் மெலமைன் செறிவின் மூன்று நிலைகளில் (0.1, 1.2, 2) கணக்கிடப்பட்டது9,11,15.
மதிப்பிடப்பட்ட தினசரி உட்கொள்ளல் (EDI) பின்வரும் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது: EDI = Ci × Cc/BW.
Ci என்பது சராசரி மெலமைன் உள்ளடக்கம், Cc என்பது பால் நுகர்வு மற்றும் BW என்பது குழந்தைகளின் சராசரி எடை.
SPSS 24 ஐப் பயன்படுத்தி தரவு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. கோல்மோகோரோவ்-ஸ்மிர்னோவ் சோதனையைப் பயன்படுத்தி இயல்புநிலை சோதிக்கப்பட்டது; அனைத்து தரவுகளும் அளவுரு அல்லாத சோதனைகள் (p = 0). எனவே, குழுக்களுக்கு இடையேயான குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகளைத் தீர்மானிக்க க்ருஸ்கல்-வாலிஸ் சோதனை மற்றும் மான்-விட்னி சோதனை பயன்படுத்தப்பட்டன.
இங்கெல்ஃபிங்கர், ஜூனியர். மெலமைன் மற்றும் உலகளாவிய உணவு மாசுபாட்டின் மீதான அதன் தாக்கம். நியூ இங்கிலாந்து ஜர்னல் ஆஃப் மெடிசின் 359(26), 2745–2748 (2008).
லிஞ்ச், ஆர்.ஏ., மற்றும் பலர். குழந்தைகளின் கிண்ணங்களில் மெலமைன் இடம்பெயர்வில் pH இன் விளைவு. சர்வதேச உணவு மாசுபாடு இதழ், 2, 1–8 (2015).
பாரெட், எம்.பி. மற்றும் கில்பர்ட், ஐ.எச். டிரிபனோசோம்களின் உட்புறத்தில் நச்சு சேர்மங்களை குறிவைத்தல். ஒட்டுண்ணியியல் முன்னேற்றம் 63, 125–183 (2006).
நிர்மன், எம்.எஃப், மற்றும் பலர். மருந்து விநியோக வாகனங்களாக மெலமைன் டென்ட்ரைமர்களின் இன் விட்ரோ மற்றும் இன் விவோ மதிப்பீடு. இன்டர்நேஷனல் ஜர்னல் ஆஃப் பார்மசி, 281(1–2), 129–132(2004).
உலக சுகாதார அமைப்பு. மெலமைன் மற்றும் சயனூரிக் அமிலத்தின் நச்சுயியல் அம்சங்களை மதிப்பாய்வு செய்வதற்கான நிபுணர் கூட்டங்கள் 1–4 (2008).
ஹோவ், ஏகே-சி., குவான், டிஎச் மற்றும் லீ, பிகே-டி. மெலமைன் நச்சுத்தன்மை மற்றும் சிறுநீரகம். அமெரிக்கன் சொசைட்டி ஆஃப் நெப்ராலஜி ஜர்னல் 20(2), 245–250 (2009).
உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC) மூலம் பால் பொருட்களில் மெலமைனை அடையாளம் காண ஒரு புதிய IMAC உறிஞ்சியை உருவாக்கும் ஓஸ்டுர்க், எஸ். மற்றும் டெமிர், என். உணவு தொகுப்பு மற்றும் பகுப்பாய்வு இதழ் 100, 103931 (2021).
சான்சுவர்ன், வி., பேனிக், எஸ். மற்றும் இமிம், ஏ. மன்னிச் பச்சை வினையின் அடிப்படையில் திரவப் பாலில் மெலமைனின் எளிய நிறமாலை ஒளிக்கதிர் அளவீட்டுத் தீர்மானம். ஸ்பெக்ட்ரோகெம். ஆக்டா பகுதி A மோல். பயோமால். ஸ்பெக்ட்ரோஸ்க். 113, 154–158 (2013).
டீப்ஸ், எம். மற்றும் எல்-ஹபீப், ஆர். HPLC/டையோடு வரிசை குரோமடோகிராஃபி மூலம் குழந்தை பால் சூத்திரம், பால் பவுடர் மற்றும் பங்காசியஸ் மாதிரிகளில் மெலமைனை தீர்மானித்தல். சுற்றுச்சூழல் பகுப்பாய்வு நச்சுயியல் இதழ், 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
ஸ்கின்னர், கே.ஜி., தாமஸ், ஜே.டி., மற்றும் ஆஸ்டர்லோ, ஜே.டி. மெலமைன் நச்சுத்தன்மை. மருத்துவ நச்சுயியல் இதழ், 6, 50–55 (2010).
உலக சுகாதார அமைப்பு (WHO), மெலமைன் மற்றும் சயனூரிக் அமிலத்தின் நச்சுயியல் மற்றும் சுகாதார அம்சங்கள்: ஹெல்த் கனடாவால் ஆதரிக்கப்பட்ட WHO/FAO கூட்டு நிபுணர் கூட்டத்தின் அறிக்கை, ஒட்டாவா, கனடா, 1-4 டிசம்பர் 2008 (2009).
கோர்மா, எஸ்.ஏ., மற்றும் பலர். புதிய செயல்பாட்டு கட்டமைப்பு லிப்பிடுகள் மற்றும் வணிக குழந்தை சூத்திரத்தைக் கொண்ட குழந்தை ஃபார்முலா பவுடரின் லிப்பிட் கலவை மற்றும் தரம் பற்றிய ஒப்பீட்டு ஆய்வு. ஐரோப்பிய உணவு ஆராய்ச்சி மற்றும் தொழில்நுட்பம் 246, 2569–2586 (2020).
எல்-வசீஃப், எம். மற்றும் ஹாஷேம், எச். பனை எண்ணெயைப் பயன்படுத்தி குழந்தை சூத்திரத்தின் ஊட்டச்சத்து மதிப்பு, தர பண்புகள் மற்றும் அடுக்கு வாழ்க்கை ஆகியவற்றை மேம்படுத்துதல். மத்திய கிழக்கு வேளாண் ஆராய்ச்சி இதழ் 6, 274–281 (2017).
யின், டபிள்யூ., மற்றும் பலர். மெலமைனுக்கு எதிரான மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளின் உற்பத்தி மற்றும் பச்சை பால், உலர்ந்த பால் மற்றும் விலங்கு தீவனங்களில் மெலமைனைக் கண்டறிவதற்கான மறைமுக போட்டி ELISA முறையை உருவாக்குதல். வேளாண்மை மற்றும் உணவு வேதியியல் இதழ் 58(14), 8152–8157 (2010).